液相色譜是一類分離與分析技術(shù)，其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名，如，紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
(一)保留時(shí)間變化
1.柱溫變化：柱恒溫，必要時(shí)需配置恒溫箱
2.等度與梯度間未能充分平衡：至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱
3.緩沖液容量不夠：用》25mmol/L的緩沖液
4.柱污染：每天沖洗柱
5.柱內(nèi)條件變化：穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相
6.柱快達(dá)到壽命：采用保護(hù)柱
(二)保留時(shí)間縮短
1.流速增加：檢查泵,重新設(shè)定流速
2.樣品超載：降低樣品量
3.鍵合相流失：流動(dòng)相pH值保持在3~7.5檢查柱的方向
4.流動(dòng)相組成變化：防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀
5.溫度增加：柱恒溫
(三)保留時(shí)間延長
1.流速下降：管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡
2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化：用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱
3.鍵合相流失：同前(二)3
4.流動(dòng)相組成變化：同前(二)4
5.溫度降低：同前(二)5
(四)出現(xiàn)肩峰或分
1.樣品體積過大：用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%
2.樣品溶劑過強(qiáng)：采用較弱的樣品溶劑
3.柱塌陷或形成短路通道：更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件
4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效：更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品
5.進(jìn)樣器損壞：更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子
(五)鬼峰
1.進(jìn)樣閥殘余峰：每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗
2.樣品中未知物：處理樣品
3.柱未平衡：重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑(尤其是離子對(duì)色譜)
4.(TFA)氧化(肽譜)：每天新配,用抗氧化劑
5.水污染(反相)：通過變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量，用HPLC級(jí)的水
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